瑞德旋转蒸发仪对忽地笑石蒜碱提取工艺优化的实验

瑞德旋转蒸发仪对忽地笑石蒜碱提取工艺优化的实验

复合酶法提取忽地笑石蒜碱的工艺优化的实验，用阳离子交换树脂分离石蒜碱。以纤维素酶与果胶酶的水溶液为提取溶剂，采用L9( 34 ) 正交试验考察了酶解pH、酶加入量、酶解时间和酶解温度等影响因素，以石蒜碱得率为指标，得*优提取工艺为:料液比1∶10，pH 4．5，酶添加量4%，酶解温度50℃，提取时间2．0 h，石蒜碱得率为0．1750%。D-001树脂纯化条件为:上样液pH为2，以3BV/h流速上样，以含1 5 mol /L氨水的70%乙醇洗脱，流速为3BV/h，利用瑞德旋转蒸发仪RE-5002初步分离后石蒜碱含量为15．28%。研究结果可为石蒜碱工业化生产提供参考。

        Agilent 1260**液相色谱仪；FD5-3型真空冷冻干燥机；RE-5002旋转蒸发器；AEG-220 型万分之一天平。

        1 实验方法

        1．1 酶种类的选择

        以石蒜碱得率为检测指标，以忽地笑鳞茎粉末为提取物料，以pH 4．5 的水为提取剂，在料液比( g∶mL) 为1∶10条件下，分别加入3%的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、纤维素酶与半纤维素酶复合酶、纤维素酶与果胶酶复合酶、半纤维素酶与果胶酶复合酶、纤维素酶与半纤维素酶及果胶酶复合酶，50℃浸提2．0h，5000rpm 离心20min，取上清液，定容至50mL，过0．45 μm滤膜后HPLC检测。

        1.2 D001树脂洗脱曲线

        D-001 阳离子树脂对石蒜碱的动态洗脱曲线。洗脱至5BV时，石蒜碱基本洗脱完全，合并0～100mL 洗脱液，用瑞德旋转蒸发仪蒸发后真空冷冻干燥，经HPLC检测，石蒜碱的纯度为15．28%。

        2 结论

        石蒜碱酶法提取的*优工艺条件为: 按料液比( g∶mL) 1∶10加入pH为4.5 的水作为提取溶剂，再加入4%的纤维素酶和果胶酶的复合酶，在50℃水浴提取2．0h，提取3次石蒜碱得率为0．1750%。石蒜碱得率影响的各因素为酶解温度＞ 酶用量＞ 酶解时间＞ 酶解pH，酶解温度对石蒜碱得率的影响显著。通过对石蒜碱的分离纯化研究，确定了*佳阳离子交换树脂分离条件: 以D-001型阳离子交换树脂进行石蒜碱分离，以3BV/h上样至饱和，以含1. 5mol /L氨水的70%乙醇溶液3 BV/h 进行洗脱，洗脱液干燥物中石蒜碱的含量为15．28%。